Une mutation unique de la protéine kinase JAK2 dans la polyglobulie de Vaquez et les syndromes myéloprolifératifs non-LMC A unique clonal JAK2 mutation leading to constitutive signalling causes polycythaemia vera

Les syndromes myéloprolifératifs chroniques (SMP) sont des hémopathies malignes ayant pour caractéristiques communes une hyperplasie myéloïde globale et une hypersensibilité aux cytokines des progéniteurs hématopoïétiques. Ce sont des maladies acquises, clonales, de la cellule souche hématopoïétique. La classification des SMP distingue : la leucémie myéloïde chronique (LMC), la polyglobulie primitive ou maladie de Vaquez, la thrombocytémie essentielle, la splénomégalie myéloïde ou myélofibrose primitive, le syndrome hyperéosinophilique, et des SMP atypiques [1]. La physiopathologie de la LMC est liée à l'existence d'une translocation équilibrée spécifique, la translocation t(9 ; 22), à l'origine du chromosome Philadelphie, qui engendre le gène de fusion BCR-ABL. La protéine bcr-abl possède une activité tyrosine kinase constitutive et interagit avec de nombreuses voies de signalisation intracellulaires. Ces dernières années, le développement d'un médicament capable d'inhiber l'activité tyrosine kinase de bcr-abl, l'imatinib mésylate (Glivec^®), a profondément modifié la prise en charge thérapeutique de cette leucémie [2]. Dans les SMP atypiques, plusieurs anomalies moléculaires ont été identifiées, conduisant toujours à une activation constitutive d'une protéine à activité tyrosine kinase [3]. Récemment, une protéine de fusion à activité tyrosine kinase constitutive a été mise en évidence dans les syndromes hyperéosinophiliques, liée à une délétion interstitielle située sur le chromosome 4 en 4q12. L'imatinib est remarquablement efficace dans les syndromes hyperéosinophiliques [4], ainsi que dans certains SMP atypiques [5, 6]. En l'absence de translocation chromosomique récurrente dans la polyglobulie de Vaquez, l'anomalie moléculaire à l'origine de la maladie est restée inconnue jusqu'ici [7, 8], mais, par analogie avec la LMC, il était probable que l'activation anormale d'une tyrosine kinase puisse être impliquée. Les progéniteurs de polyglobulie de Vaquez présentent une hypersensibilité à l'érythropoïétine (Epo), ainsi qu'au SCF (stem-cell factor), au GM-CSF (granulocyte-macrophage-colony stimulating factor), à l'IL-3 (interleukine-3) et à l'IGF-1 (insulin-like growth factor-1). En utilisant des inhibiteurs biochimiques, nous avons montré que les voies JAK2-STAT5 et PI3-kinase étaient nécessaires à la différenciation érythroblastique terminale indépendante de l'Epo [9]. JAK2 est une protéine à activité tyrosine kinase constitutivement associée au récepteur de l'Epo, dépourvu lui-même d'activité kinase intrinsèque. Dans des conditions physiologiques, la phosphorylation de JAK2 induite après fixation de l'Epo sur son récepteur est la première étape nécessaire à l'activation des voies de signalisation. Nous avons mis en évidence, par séquençage direct de la partie codante du gène JAK2, une mutation ponctuelle située dans l'exon 12, présente chez environ 85 % des polyglobulies de Vaquez étudiées. La mutation n'a été retrouvée chez aucun des témoins étudiés (normaux et polyglobuliques secondaires). Cette mutation entraîne la substitution d'une valine en phénylalanine en position 617 (V617F). Il s'agit d'une mutation unique (aucune autre mutation de JAK2 n'a été trouvée), et clonale car elle est présente dans les cellules myéloïdes des patients (PNN, érythroblastes, plaquettes), mais pas dans leurs lymphocytes T [10]. La mutation JAK2 V617F est située dans le domaine JH2 ou domaine pseudo-kinase de JAK2, qui régule négativement l'activité kinase de la protéine. Sur un plan fonctionnel, la protéine JAK2 mutée est spontanément active, capable d'induire une activité transcriptionnelle de STAT5 en l'absence d'Epo dans un modèle de transfection transitoire, et de conférer une hypersensibilité aux cytokines dans des lignées cellulaires (Figure 1A). Les effets in vivo de la mutation ont été étudiés. Des souris greffées avec des cellules de moelle osseuse exprimant la protéine JAK2 mutée développent une polyglobulie et une splénomégalie (Figure 1B). L'ensemble de ces résultats nous permet de proposer que la mutation JAK2 V617F est l'événement moléculaire primaire et suffisant pour entraîner le développement d'une polyglobulie primitive [10]. De façon surprenante pour une mutation activatrice, la mutation est …