Characterization of a monoclonal antibody to turnip mosaic virus and its use in immunodiagnosis of infection

Abstract

Monoclonal antibodies specifie for turnip mosaic virus (TuMV) were produced and used in a double antibody sandwich enzyme immunoassay to detect virus in infected plants. One particular antibody from a hybridoma clone having desirable growth, specificity and antibody production properties was characterized in detail. This antibody was shown by immunocytochemical electron microscopy and immunoblotting to react with a virion coat protein. Conditions providing efficient extraction of virus from leaves were investigated by using the antibody in both capture and detection steps of a sandwich immunoassay. With an extraction buffer System containing multiple detergents, a highly sensitive assay was produced that reliably detected virus in infected plants. This assay is now in routine use for immunodiagnosis of turnip mosaic virus infections.

Résumé

Des anticorps monoclonaux spécifiques au virus de la mosaïque du panais (TuMV) ont été produits et utilisés dans un bioessai en sandwich à double anticorps afin de détecter des virus dans des plantes infectées. Un anticorps particulier d'un clone hybridome ayant les caractéristiques recherchées de croissance, de spécificité et de production d'anticorps a été décrit. Cet anticorps a été montré par microscopie électronique immunocytochimique and par immunodétection en point comme réagissant avec une protéine d'enrobage d'un virion. Les conditions procurant une extraction efficace du virus à partir des feuilles ont été étudiées par l'utilisation de l'anticorps dans les étapes de capture et de détection du bioessai en sandwich. Avec un système de tampons d'extraction contenant plusieurs détergents, un essai très sensible a été produit qui détecte des virus de façon fiable dans les plantes infectées. Cet essai est maintenant utilisé de façon routinière pour l'immunodiagnostic des infections causées par le virus de la mosaïque du panais.